Hitri test adenovirusa - nosno izločanje

Predvidena uporaba:

Komplet za testiranje nukleinske kisline SARS-CoV-2 se uporablja za kvalitativno odkrivanje nukleinske kisline COVID-19 v brisu nazofarinksa, brisu iz ustne votline in izpljunku. Rezultati testov zagotavljajo osnovo za molekularno diagnozo okužbe ali sumljivih bolnikov in se ne smejo uporabljati kot edino merilo za klinično diagnozo.

Materiali:

Testni postopek:

A. Priprava vzorca

Ekstrahirana RNA je izhodiščni material za komplet za testiranje nukleinske kisline SARS-CoV-2.

Pomembno: Vsak postopek ekstrakcije nukleinske kisline je treba izvesti hkrati z eno pozitivno kontrolo (40 μL, razredčimo s sterilnimi fiziološkimi raztopinami/PBS do želenega volumna) in eno negativno kontrolo (40 μL, razredčimo s sterilnimi fiziološkimi raztopinami/PBS do želenega volumna).

Priporočljiva je uporaba naslednjih komercialnih kompletov za ekstrakcijo nukleinskih kislin: PureLinkTM Mini Kit za virusno RNA/DNA (Invitrogen); Mini komplet virusne RNA (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA komplet (TIANGEN);

B. Priprava reakcijske mešanice

1. Vse reagente in vzorce je treba pred uporabo popolnoma odmrzniti, popolnoma premešati in na kratko centrifugirati pri sobni temperaturi (približno območje 18 do 25 stopinj).

2. Pripravite zahtevano količino reakcijske mešanice v primerno veliki polipropilenski mikrocentrifužni cevi.

3. Odpipetirajte 25 µL reakcijske mešanice v vsako zahtevano vdolbino ustrezne optične 96-reakcijske plošče ali ustrezne optične reakcijske cevi.

C. Dodatek predloge

1. Dodajte 5 μL ekstrahirane RNA iz vzorcev/pozitivne kontrole/negativne kontrole. Skupna prostornina je 30 μL.

2. Vzorce in kontrole temeljito premešajte z reakcijsko mešanico s pipetiranjem gor in dol/Vortex.

3. Zaprite reakcijsko ploščo 96-vdolbine z ustreznimi pokrovi ali optično lepilno folijo in reakcijske cevi z ustreznimi pokrovi.

4. Centrifugirajte reakcijsko ploščo 96-vdolbine v centrifugi z rotorjem mikrotitrske plošče 30 sekund pri približno 2500 vrt./min.

D. Programiranje instrumenta PCR v realnem času

Za osnovne informacije v zvezi z nastavitvijo in programiranjem različnih instrumentov PCR v realnem času si oglejte uporabniški priročnik zadevnega instrumenta. Test je optimiziran za sistem ABI7500 PCR v realnem času. Test PCR se izvaja s cikličnimi pogoji, kot je opisano v spodnji tabeli.

Določite detektorje fluorescence

*Prosimo, nastavite notranjo referenco fluorescence instrumenta na "Brez", na primer: Za instrumente serije ABI nastavite "Pasivno referenco" na "Brez".

E. Analiza podatkov

Prosimo, nastavite parametre analize in analizirajte podatke v skladu z navodili za uporabo ustreznih instrumentov.

Vzemite ABI 7500 kot primer:

Izhodišče mora biti nastavljeno na obseg, ki odpravlja fluorescenco ozadja v zgodnjih ciklih ojačanja, vendar ne prekriva območja, kjer se ojačani signali dvigajo nad ozadje (začetna vrednost: 3~10; končna vrednost: {{2} }). Prag cikla (Ct) mora biti na dnu eksponentne faze. Kliknite »Analiza«, da samodejno pridobite rezultat analize, in preberite rezultat zaznave v oknu »Poročilo«.

Priljubljena oznake: adenovirus hitro test - nosni izločanje, Kitajska, dobavitelji, proizvajalci, tovarna, razsutem stanju